Hvordan til at identificere Gram -positive stave

Siden 1880'erne Gram pletten test er stadig en vigtig metode til bakteriel identifikation og klassificering . Mikrobiologer ofte udfører Gram testen som det første skridt i at identificere bestemte typer af stavformede bakterier fra slægten Bacillus. Gram farvning er opkaldt efter sin opfinder, dansk bakteriolog Hans Christian Gram . Teknikken virker på grund af en forskel i gram positive og gram-negative bakterielle cellevæg fysiologi. Visse grampositive stave forårsage alvorlige sygdomme såsom miltbrand og tetanus.Things du har brug
Lab tøj
Handsker
Shoe belægninger
Trykkoger
Bakterier koloni
Agar
Petri retter
Vand
Podning loop
objektglas
Methanol
bunsenbrænder
Crystal violet plet
Jod pletten reagens
Decolorizer
Safranin
Fuchsin løsning
absorberende papir
mikroskop myHotelVideo.com: Vis Flere Instruktioner
1

Fastgør brug af en ren, aseptisk laboratorium plads til at gennemføre Gram-farvning test. Bær ren lab tøj og sko, for at forhindre forurening . Brug handsker og en maske ved håndtering af bakteriekulturer . Isoler en koloni af bakterier til din test og vokse det ud på næringsrige agar i petriskåle . Sterilisere petriskåle og agar med en trykkoger , før du bruger .
2

Tilføj et par dråber rent vand til kulturen parabol. Fordel det jævnt over agar. Træk et podning løkke let hen over agar overflade. Prøven overføre på et rent objektglas og smøre det jævnt i cirkulært område på størrelse med en skilling. Holde størrelsen af prøven minimal; du bør være knap nok i stand til at se det med det blotte øje.
3

Påfør 95 procent metanol over slide smøre i to minutter til at fastsætte cellerne og forhindrer forvrængning af deres morfologi . Lufttørre dias eller opvarmes forsigtigt over en lav bunsenbrænder flamme. Flyt slide back -og-tilbage til at varme jævnt og undgå lokaliserede hot spots. Anvende varmen ensartet og konsekvent. Undgå at tage slæden ud af flammen , indtil du er færdig med at varme det .
4

Hæld krystalviolet plet reagens over faste dias. Lad det stå i 30 til 60 sekunder . Skyl pletten med vand fra hanen i et par sekunder . Dræn overskydende vand fra diaset. Dæk objektglasset med iodfarvning reagens i 30 til 60 sekunder . Afvask iod med vand fra hanen . Vip dias og tilføje et par dråber Decolorizer . Anvende den indtil afstrømning er ren . Vask diaset.
5.

Soak slide med pink -farvet safranin counter - farvningsreagens i 30 sekunder. Du kan erstatte grundlæggende fuchsin løsning til safranin . Vask forsigtigt dias og ryste overskydende vand. Dup dem tørre med absorberende papir og derefter lufttørre diaset. Undersøg forberedt objektglas under et mikroskop udstyret med en lyskilde. Kig efter og identificere Gram-positive bakterier stænger med blå eller violet farve fra Gram-farvning test .
Hoteltilbud