Sådan foretages fejlfinding af en Primer Dimer

Polymerasekædereaktionen eller PCR , er en teknik i molekylærbiologi anvendes til at forstærke bestemte regioner af DNA. PCR er afhængig af primere , som er korte DNA-strenge , der er komplementære og specifikke for DNA'et af interesse . Mens primere generelt vil binde til DNA matcher deres rækkefølge , de lejlighedsvis vil binde til og forstærke hinanden , hvilket får fænomen kendt som en primer dimer.Things du har brug KAYAK Primersekvenser myHotelVideo.com: Vis mere Instruktioner

1

Undersøg GC-indhold (antal G og C 's ) i din primersekvens . GC limning er stærkere end AT binding på grund af yderligere hydrogenbinding mellem guanin og cytosin . Optimal limning er mindst 50 procent GC-indhold .
2

Undersøg annealingstemperaturen af din reaktion . Lave udglødningstemperaturer , generelt defineret som 55 ° C eller derunder, kan forårsage ikke-specifik binding af primeren , som kan forårsage primerdimerer i tillæg til amplifikation af ukorrekte genomiske sektioner.
3

Dobbelt -check mængde og koncentration af primere du tilsat til PCR . Et overskud af primere , generelt mere end 75 picomol , kan forårsage primerdimerer , så godt.
Hoteltilbud